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高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

【概要描述】在使用高效液相色谱仪时会遇到很多问题,一般来说,柱压问题尤为常见,很多人都在问关于这个问题,那么今天就来讲一下高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

【概要描述】在使用高效液相色谱仪时会遇到很多问题,一般来说,柱压问题尤为常见,很多人都在问关于这个问题,那么今天就来讲一下高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

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在使用高效液相色谱仪时会遇到很多问题,一般来说,柱压问题尤为常见,很多人都在问关于这个问题,那么今天就来讲一下高效液相色谱仪柱压问题及解决方法!

一、压力太大,这是 HPLC 使用中的常见问题,是指压力突然升高。

解决方法:

1、一般是由于流路堵塞造成的。 在这一点上,我们应该检查部分。

2、首先断开真空泵的入口。 此时PEEK管内充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴落。 如果液体不滴落或滴落缓慢,则溶剂过滤头堵塞。 处理方法:用30%的硝酸浸泡半小时,然后用超纯水冲洗干净。 如果液体自由滴落,则溶剂滤头正常,检查;

3、打开吹扫阀,使流动相不通过色谱柱。 如果压力没有明显下降,则过滤器白头被阻塞。 处理方法:取出过滤后的白头粉刺,用10%异丙醇超声半小时。 如果压力降到100PSI以下,过滤白头正常,检查;

4、拆下色谱柱的出口端。 如果压力没有下降,则色谱柱被堵塞。 处理方法:如果缓冲盐堵塞,用95%的水冲洗,直至压力正常。 如果某些强保留物质导致堵塞,请用比当前流动相更强的流动相冲洗,直到压力正常为止。如果按上述方法冲洗压力长时间没有下降,可以考虑将色谱柱的进出口反接仪器,用流动相冲洗色谱柱。 这时候如果柱压还是不下降,只能更换柱入口筛板,但一旦不操作,很容易造成柱效下降,尽量少用。 如果问题无法解决,请考虑更换色谱柱。流量设置不正确:可以重新设置正确的流量。流动相配比不正确:不同配比的流动相粘度系数不同,粘度较高的流动相对应的系统压力也较大。 如果可能,更换粘度较低的溶剂或重新设置比率。系统压力零漂:调整压力传感器的零点。

二、压力过低

解决方法:

1、通常由于系统泄漏,处理方法:找到各个接口,尤其是色谱柱两端的接口,将泄漏处拧紧。 取下色谱柱并用适当的力将其拧紧或用 PTFE 薄膜衬里。

2、空气已进入泵内,但此时压力往往不稳定、波动,甚至更严重的泵将无法吸出液体。 处理方法:打开Purge阀,以3~5ml/min的流速冲洗。 如果没有,请用注射器通过外力将排空阀处的气泡吸出。
 
3、无流动相流出:检查储液瓶中是否有流动相,水槽是否浸入流动相中,泵是否运转。

4、参考阀未关闭:降低流量,然后关闭参考阀。 一般在下降到0.1~0.2mL/min后关闭参比阀。

柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。

以上是关于柱压问题的解答,如有其他关于液相色谱仪问题的,可继续浏览我们的网站!

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