高效液相色谱对流动相的要求!
- 分类:色谱仪资讯
- 发布时间:2022-07-22 09:23
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【概要描述】高效液相色谱仪又称高压液相色谱仪、高速液相色谱仪、高分辨液相色谱仪等。它是在经典液相色谱仪的基础上,在1960年代后期引入气相色谱理论而迅速发展起来的。 那么高效液相色谱对流动相的要求是什么?其实主要为以下几点!
高效液相色谱对流动相的要求!
【概要描述】高效液相色谱仪又称高压液相色谱仪、高速液相色谱仪、高分辨液相色谱仪等。它是在经典液相色谱仪的基础上,在1960年代后期引入气相色谱理论而迅速发展起来的。 那么高效液相色谱对流动相的要求是什么?其实主要为以下几点!
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高效液相色谱仪又称高压液相色谱仪、高速液相色谱仪、高分辨液相色谱仪等。它是在经典液相色谱仪的基础上,在1960年代后期引入气相色谱理论而迅速发展起来的。 那么高效液相色谱对流动相的要求是什么?其实主要为以下几点!
1、纯度:流动相必须是HPLC级试剂,使用前必须过滤除去其中的颗粒杂质等物质(用0.45um或更细的滤膜过滤)。 含有溶剂的杂质会积聚在色谱柱上,会影响色谱柱的使用寿命。
2、溶解度:样品的溶解度要适当。 如果溶解度差,样品会在柱头沉淀,不仅影响纯化分离,还会缩短柱子的使用寿命。
3、粘度要低(应小于2cp)。 高粘度溶剂会影响溶质的扩散和传质,降低柱效,还会增加柱压降,延长分离时间。 最好选择沸点低于 100 °C 的流动相。
4、样品易于回收。 应使用挥发性溶剂。
5、流动相:用反相色谱分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,调节流动相的pH值,抑制样品成分的解离。 增加组分在固定相上的保留和改善峰形的技术称为反相离子抑制。 对于弱酸,流动相的pH值越小,成分的k值越大。 当pH值远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在; 对于弱碱基,情况则相反。 分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,通常为 50mmol/L 磷酸盐缓冲液和 1% 乙酸溶液; 分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,通常为 50mmol/L 磷酸盐缓冲液和 30mmol/L 三乙胺溶液。
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