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分光光度计的原理以及操作流程!

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【概要描述】光谱仪又称分光光度计,是一种将具有复杂成分的光分解成光谱线的科学仪器。那么今天来介绍一下分光光度计的原理以及操作流程!

分光光度计的原理以及操作流程!

【概要描述】光谱仪又称分光光度计,是一种将具有复杂成分的光分解成光谱线的科学仪器。那么今天来介绍一下分光光度计的原理以及操作流程!

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光谱仪又称分光光度计,是一种将具有复杂成分的光分解成光谱线的科学仪器。那么今天来介绍一下分光光度计的原理以及操作流程!

分光光度计的测量范围一般包括波长范围为 380 至 780 nm 的可见光区和波长范围为 200 至 380 nm 的紫外区。 不同的光源有自己独特的发射光谱,因此可以使用不同的发光体作为仪器的光源。 钨灯发射光谱:钨灯光源发射的380-780nm波长的光谱光经棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱图; 该色谱图可作为分光光度计的可见光源。


一、分光光度计的原理:

分光光度计使用可以产生多种波长的光源。 通过一系列分光装置,产生具有特定波长的光源。 光线通过被测样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光度值,转化为样品的浓度。  . 样品的吸光度与样品的浓度成正比。


单色光辐射通过被测物质溶液时,被物质吸收的量与物质浓度和液层厚度(光程长度)成正比,关系如下:


  A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
  式中:A为吸光度;
  I0 为入射单色光强度;
  I 为透射单色光强度;
  T——物质的透光率;
  k 为摩尔吸光系数;
  L为待分析物质的光路,即比色皿的边长;
  c 是物质的浓度;

物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是物质的物理常数。 当纯物质在一定条件下的吸光系数已知时,可将供试品在相同条件下配制成溶液,测定其吸光度,由上式可计算出供试品中该物质的含量 公式。 在可见光区,除了一些吸收光的物质外,很多物质本身不吸收光,但可以通过加入显色剂或在一定条件下显色处理来确定,因此也称为比色分析。 由于显色时影响色深的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,因此测定时应同时使用标准物质或对照物质。


二、分光光度计的操作方法:


  1、打开电源,打开仪器开关,打开样品室暗箱盖,预热10分钟。
  2.将灵敏度开关调到“1”档(如果零位调节器没有调到“0”档,则应选择更高的档位。)
  3. 根据所需波长转动波长选择器旋钮。
  4、将空白溶液和测定溶液分别倒入比色皿的3/4处,用镜头纸擦拭外壁,放入样品室,将空白管对准光路。
  5、调零位调节器,暗箱盖打开,使读盘指针指向t=0。
  6、合上暗箱盖,调节“100”调节器使空白管的t=100,待指针稳定后逐渐拉出样品滑杆,读出测量管的光密度值 并记录下来。
  7、比色完成后,关闭电源,取出比色皿清洗,用软布或软纸擦拭样品室。

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