高效液相色谱仪的组成结构是什么?
- 分类:色谱仪资讯
- 发布时间:2022-05-25 10:38
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【概要描述】由德谱仪器整理出来的内容,给大家讲解高效液相色谱仪的组成结构是什么?有兴趣的可以看看!
高效液相色谱仪的组成结构是什么?
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我们都知道高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、别离系统、检测系统和数据处理系统组成,那么这些组成结构是怎样的呢?下面由德谱仪器整理出来的内容,给大家讲解高效液相色谱仪的组成结构是什么?有兴趣的可以看看!
1.进样系统
一般选用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的,这对进步剖析样品的重复性是有利的。
2.输液系统
该系统包含高压泵、活动相储存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa流速可调且安稳,当高压活动相经过层析柱时,可降低样品在柱中的分散效应,可加速其在柱中的移动速度,这对提升分辨率、收样品回收、保存样品的生物活性等都是有益的。活动相储存错和梯度仪,可使活动相随固定相和样品的性质而改变。包含改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或改用 。
3.分离系统
该系统包含:色谱柱、连接管和恒温器等。
色谱柱一般长度为10~50cm(需求两根连用时,可在二者之间加一连接收)内径为2~5mm,由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,柱内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成),固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如,硅胶外表的硅酸基因基本已除掉)、多孔性和比外表积大的特色,加之其外表经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备相同)或许用化学法偶联各种基因(如,磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。
因而,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性,例如,在多孔性硅胶外表偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。固定相基质粒小,柱床极易到达均匀、致密状态,极易降低涡流分散效应。基质粒度小、微孔浅,样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提升分辨率是有益的。根据柱效理论剖析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小,会提升分辨率的道理。再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60℃经过改进传质速度,缩短剖析时间,就可添加层析柱的效率。
4.检测系统
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种:
(1)紫外检测器
该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收功能样品的检测。其特色:运用面广(如,蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可运用);灵敏度高(检测下限为10-10g/mL);线性范围宽;对温度和流速变化不灵敏;可检测梯度溶液洗脱的样品。
(2)示差折光检测器
凡具有与活动相折光率不同的样品组分,均可运用示差折光检测器检测。糖类化合物的检测运用此检测系统。这一系统通用性强、操作简略,但灵敏度低(检测下限为10-7g/mL)活动相的变化会引起折光率的变化。因而,它既不适用于痕量剖析,也不适用于梯度洗脱样品的检测。
(3)荧光检测器
凡具有荧光的物质,在必定条件下,其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因而,这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物(如,多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等)的测定,其灵敏度很高(检测下限为10-12~10-14g/mL)痕量剖析和梯度洗脱著作的检测均可选用。
5.数据处理系统
该系统可对测试数据进行收集、储存、显示、打印和处理等操作,使样品的别离、制备或判定作业能正确开展。
以上是高效液相色谱仪组成结构的介绍,如您有该设备需求的,可在线咨询,或填写信息联系我们。我们将第一时间给您报价参数信息等!
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